Cistina Coração Agar Base
O Ágar Cistina Coração, quando enriquecido com hemoglobina, é recomendado para o cultivo de Francisella tularensis.
Sem enriquecimento, ele suporta um excelente crescimento de cocos Gram-negativos e outros organismos patogênicos.
Composição
Ingredientes Gms / Litro
Coração de carne, infusão de 500.000
Proteose peptona 10.000
Dextrose 10.000
Cloreto de sódio 5.000
L-Cistina 1.000
Agar 15.000
PH final (a 25 ° C) 6,8 ± 0,2
Instruções
Suspenda 51 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. Esterilizar em autoclave em
15 libras de pressão (121 ° C) por 15 minutos. Quando for enriquecido com hemoglobina (2%), suspender 10,2 gramas de meio em 100
ml de água destilada. Esterilize como descrito acima. Resfrie o meio a 50 ° C e adicione assepticamente 100 ml de solução de hemoglobina estéril a 2%.
Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.
Princípio e interpretação
Francisella tularensis é a causa da tularemia, uma doença semelhante à peste que afeta os roedores e outros pequenos organismos. Foi primeiro
descrito em humanos em 1907. Os organismos são aeróbios estritos; isolados frescos não podem ser cultivados em meio comum, mas
requerem um meio complexo contendo sangue ou extratos de tecido e cistina. Várias formulações de mídia foram empregadas para
isolar este microrganismo. Sangue Dextrose Cistina Agar, descrito por Francis foi considerado satisfatório para o cultivo
F. tularensis. A adição de 0,05% de cistina e 1% de dextrose ao Heart Infusion Agar também pode ser empregada para o cultivo de F.
tularensis!. Posteriormente, a hemoglobina foi adicionada ao Cistina Coração Agar Base para desenvolver um meio de cultivo satisfatório
para F. tularensis. Este meio também é conhecido como Ágar Cistina Glicose Sangue e é o meio mais adequado para
isolando F. tularensis. A hemoglobina fornece nutrientes adicionais e fatores de crescimento. Este meio também suporta o crescimento
de cocos gram-negativos e outros microorganismos patogênicos sem enriquecimento adicional. Cistina Coração Agar Base pode ser
suplementado com sangue de coelho e agentes antimicrobianos.
Este meio é um meio nutricionalmente rico, que também pode ser usado para o cultivo de muitos outros organismos geralmente difíceis
crescer.
Infusão de coração de carne e peptona de proteose são fontes de carbono, nitrogênio, vitaminas e minerais. Dextrose é uma fonte de energia.
L-cistina é a fonte de aminoácidos. O cloreto de sódio fornece os íons essenciais. Supercrescimento por organismos contaminantes
pode ser reduzido incorporando 100-500 unidades de penicilina por ml no meio.
F. tularensis é um patógeno de nível de biossegurança que pode ser transmitido por aerossóis ou por penetração de pele intacta.
O uso de aventais, luvas e máscaras é recomendado para pessoas que manuseiam materiais suspeitos de infecção.
Controle de qualidade
Aparência
Pó de fluxo livre homogêneo de creme a amarelo
Gelatinoso
Firme, comparável com gel de ágar a 1,5%
Cor e clareza do meio preparado
Meio basal: Gel transparente a ligeiramente opalescente de cor âmbar Após adição de solução de hemoglobina a 2%: Castanho chocolate
formas de gel opaco colorido em placas de Petri
Reação
Reação de solução aquosa 5,1% p / v a 25 ° C. pH: 6,8 ± 0,2
pH
6,60-7,00
Resposta Cultural
M172: Características culturais observadas com a adição de 2% de hemoglobina após uma incubação a 35-37 ° C durante 40-48 horas.
